人白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒說明書實驗指導

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公司名稱:上海yp街機生物科技有限公司 型 號: 生產地址:中國大陸 已獲點擊:1809 簡單介紹: 上海yp街機生物是國內外專業的酶聯免疫技術代理生產廠商, 試劑盒性能穩定,操作方便,靈敏度高!全程提供技術指導,有質量問題,免費包退換,提供免費代測服務,歡迎聯係!
詳細內容

【產品中文名稱】 人白介素12(IL-12/P40)ELISA 試劑盒
【產品英文名稱】 Human Interleukin 12,IL-12/P40 ELISA kit 
【保存溫度】 2-8℃,避光保存
【產品規格】 96T/48T 
【有效期】  6個月 
人白介素12(IL-12/P40)ELISA 試劑盒
操作流程
1. 加入10 μL 校準品、質控品、待測樣品到反應板孔內;
2. 加入100 μL酶標抗體工作液到反應板孔內;
3. 室溫搖床溫育120 min;
4. 洗板6次;
5. 加入1X底物工作液100 μL;
6. 室溫溫育15 min;
7. 加入100 μL終止液,搖勻約5 s;
8. 用波長325 nm/420 nm的激發/發射光檢測
人白介素12(IL-12/P40)ELISA 試劑盒
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控製試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。
     有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。
     其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:
     用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
(2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表麵時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。
   吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被的*適濃度需進行滴定:
   即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被後,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。
   選擇OD值*而蛋白量*少的濃度。對於多數蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。
    然後再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)
    在正式實驗係統裏準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。
   有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間後,
    應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鍾為宜。底物使用液必須新鮮配製,尤其是H2O2在臨用前加入.
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標簽:人白介素12   IL-12/P40   
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