人補體片斷3aELISA試劑盒 人C3a試劑盒7折促銷

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公司名稱:上海yp街機生物科技有限公司 型 號: 生產地址:中國大陸 已獲點擊:1237 簡單介紹: 人補體片斷3aELISA試劑盒 人C3a試劑盒由上海yp街機生物提供。人C3a試劑盒靈敏度高,權威酶聯免疫技術服務,提供專業代測服務,享受零運費運輸,售後完善。ELISA試劑盒,品質保證!售前售中售後全程提供技術指導,有質量問題免費包退包換!了解產品詳情,歡迎來電谘詢。
詳細內容
 
人補體片斷3aelisa試劑盒                
人C3a試劑盒   人C3a ELISA KIT            
Human Complement fragment 3a,C3a ELISA kit                
                 
產品中文: 人補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒
產品英文: Human Complement fragment 3a,C3a ELISA kit
貨號: XF00906B
規格: 48T/96T
保質期: 6個月
保存條件: 2到8度
                 
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ELISA技術原理:以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來.
1. 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
2. 結合在固相載體表麵的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
3. 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
4. 受檢標本與固相載體表麵的抗原或抗體起反應。再加入酶標記 的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。
5. 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
6. 加入酶反應的底物後,底物被酶催化成為有色產物,產物的量 與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定 性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水 平),並且重複性好。
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樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鍾,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉澱,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鍾後,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉澱形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反複凍融,以使細胞破壞並放出細胞內成份。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本後,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化後仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝後一份待檢測,其餘冷凍備用。
6. 標本采集後盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放於-20℃保存,但應避免反複凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑製辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
                 
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操作步驟
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然後在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然後從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然後在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻後從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻後從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻後從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋後各孔加樣量都為50μl,濃度分別為30ng/L,20ng/L ,10ng/L,5ng/L, 2.5ng/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其餘各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然後再加待測樣品10μl(樣品*終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加於酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾。
4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋後備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩幹,每孔加滿洗滌液,靜置30秒後棄去,如此重複5次,拍幹。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鍾. 
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液後15分鍾以內進行。
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鍾後方可使用,酶標包被板開封後如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,並經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間*控製在5分鍾內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,*做複孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大於標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)後再測定,計算時請*後乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜隻限一次性使用,以避免交叉汙染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
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